Tinktorska svojstva - osnova mikroskopije bakterija

Raznolikost bakterijskih infekcija zahtijeva jasnu identifikaciju patogena i definiciju njezine vrste. Utvrditi vrstu mikroorganizma mikrobiolozi se pomažu svojim tinktorskim svojstvima - osjetljivost mikroba na bojenje različitim bojama. Ova metoda vam omogućuje da istražite morfologiju patogena. Tinktorska svojstva bakterija od velike su važnosti za praktična i teorijska istraživanja u području mikrobiologije.

Istraživanje mikroba

U bakteriologiji postoje mnoge metode bojenja mikroorganizama. Svi se temelje na tinktorskim svojstvima bakterija. Obojenje omogućuje određivanje njihovog oblika, strukture, veličine i relativnog položaja. To omogućuje rješavanje problema sistematizacije mikroorganizama opće biologije i komparativne mikrobiologije.

Zašto ih slikati?

Bakterije - to je gotovo prozirna organizmi, bez uporabe bojanja su slabo vidljive na konvencionalnu mikroskopiju. Možete koristiti posebne vrste mikroskopa (fazni kontrast, tamno polje) za proučavanje predmeta, ali najlakši način je da se boje, nakon čega su bakterije postaju vidljivi u svakodnevnom svjetlosnim mikroskopom.

Priprema uzorka

Bez obzira na tehniku ​​bojanja koja se koristi, postoje jednoobrazna pravila za pripremu predmeta koji se istražuje. Obavezne su sljedeće faze:

• Sterilni instrumenti stvaraju mrlje na slajdu.
• Uzorak se suši. To se radi na sobnoj temperaturi ili korištenjem ormara za sušenje.
• Zatim slijedi stadij fiksacije - mikroorganizmi se pričvršćuju na staklo s posebnim kompozicijama.
• Stvarno bojenje - uzorak je prekriven boja za određeno vremensko razdoblje, nakon čega se isperu.
• Konačno sušenje - uzorak se opet osuši.
  

Najčešći bojila

Najčešće se koriste boje na bazi anilina s različitim kiselim vrijednostima (pH). Većina boja su prašci koji se uzgajaju u alkoholu.

Boje, u kojima su sredstva za bojenje kationi, nazivaju se bazičnim (pH veći od 7). Oni se mogu koristiti za bojenje mikroorganizme u crvenom (magenta, safranina), ljubičasta (metilviolet, thionine), plava (metilen plavo), zelena (malahit zeleno), smeđa (dobio chrysoidine) i crne (indulin) boja.

Boje, u kojima su agensi za bojanje anioni, nazivaju se kiseli (pH manje od 7). Uzorci će bojiti u crvenoj (eozini), žuti (pikrin) ili crnoj (nigrozinoj) boji.

Postoji skupina neutralnih boja (na primjer, rodamin B), gdje su agensi za bojanje kationi i anioni.

Kultura je živa ili mrtva

Postupci bojenja podijeljeni su u dvije skupine prema životnom obliku ispitnog uzorka.

• Vitalno (intravitalno) bojenje. Ova metoda proučavanja svojstava mikroorganizama koristi se u istraživanju živih tkiva, što omogućuje promatranje procesa života mikroba. Za takvo bojenje koriste se boje s niskom toksičnošću i visokom penetracijskom snagom.
• Postestalno bojenje. Ovo je bojenje mrtvih ili ubijenih mikroorganizama. Zbog tinktorskih svojstava bakterija, mikrobiolozi određuju njihovu strukturu. To je ta obojenost koja se najčešće koristi.

Gram-pozitivne i gram-negativne

To su obilježja bakterija koje se mogu naći u uputama za različite lijekove. Ova metoda proučavanja tinktorskih svojstava bakterija temelji se na korištenju gentian violet boja i fiksacije s jodom. To je tehnika Hans Christian Gram, danskog liječnika koji ga je predložio 1884. godine. Kao rezultat ovog bojenja, bakterije su podijeljene u dvije skupine:

• Gram (+) - obojana plava (stafilokokti i streptokoki).
• Gram (-) - obojene su u boji od ružičaste do crvene (enterobakterije, salmonela, E. coli).

Različit je rezultat bojenja zbog nejednakih tinktorskih svojstava bakterijskih zidova. Metoda bojanja Gram i danas je glavna u dijagnozi nekih zaraznih bolesti.

Ostale metode bojenja

Navedimo karakteristike nekoliko drugih metoda koje se široko koriste u bakteriologiji.

• Metoda Tsilya-Nelson - određuje kiselinsku otpornost bakterija. Identificira uzročnike tuberkuloze i mikobakterije.
• Metodologija Romanovsky-Giemsa - mrlja acidophilus (octena kiselina i mliječna kiselina) bakterija u crvenim i bazofilima (spirohete i protozoa) - plavo.
• Morozovova metoda - mrlja bakterije u smeđoj boji i čini njihova flagella vidljiva.

Možete vidjeti spore

Bojenje s fucinom Zilya omogućuje da vidite spore bakterija. Nakon bojanja ružičaste boje, oni su jasno vidljivi na pozadini plavih bakterija. Ova metoda je također instrument bakteriologije i ima veliku praktičnu važnost.